# File: EGR_public.dat # May be copied for noncommercial use. # For commercial use, contact Gary Stormo. # # Authors: P.V. Benos, D.S. Fields and G.D. Stormo # # Panayiotis V. Benos, Gary D. Stormo # A300 Crabtree Hall, Campus Box 8232, # Dept. Human Genetics, Dept. Genetics, # Graduate School of Public Health, School of Medicine, # University of Pittsburgh, Washington Univ. in St. Louis, # 130 DeSoto Street, 4566 Scott Avenue, # Pittsburgh, PA 15261, U.S.A. St. Louis, MO 63110, U.S.A. # # benos@hgen.pitt.edu stormo@genetics.wustl.edu # # # References # 1. P.V. Benos, A.S. Lapedes and G.D. Stormo, # "Probabilistic code for DNA recognition by proteins of the EGR-family", # J. Mol. Biol., (2002) 323:701-727 # 2. P.V. Benos, A.S. Lapedes, D.S. Fields and G.D. Stormo, # "SAMIE: Statistical Algorithm for Modeling Interaction Energies", # Pac. Symp. Biocomput. (2001) 6:115-126. # # # Last updated: 13.July.2001 # #DESCRIPTION # #This file is a collection of some of the published site-specific #DNA-protein contacts for Zif268 ("zinc finger clone # 268"), #alias NGFI-A ("nerve growth factor"), Egr1 ("early growth response"), #Krox-24 ("Kruppel box"). Closely related proteins are also presented. # #Any line in this file beginning with a "#" is a comment line. Comment #lines can be altered with no effect whatsoever on the accompanying #analyzing program, EGRscan1.pl. (Well, you still need to start the line #with a "#".) Any line beginning with a "5'" or with no "#" is the actual #data, and should be altered with care because the whitespace is utilized by #EGRscan1.pl. Empty comment lines are used to help improve the readability #of this file by humans. # #Data entries are always preceded by their respective sources. #The "5'" data lines always give the DNA sequence (i.e. there's no default #DNA site). The DNA site is written as three 3-base subsites to correspond #to the idea that each zinc finger contacts its own 3-base subsite. Since #it has been pointed out that the subsite might actually be 4 bases #long, an additional base is listed for the third subsite. In this view, #the site can be considered to be three 4-bp subsites which overlap by #one base. The default (partial) protein sequence for the three zinc #fingers of Zif268 is noted as such below. Any changes to the default #protein sequence are given on the same line as their respective #DNA sites, and small x's are used a placeholders (they don't mean anything #else!). A "-" in either a DNA site or protein sequence means "no data." #Since a lot of the data comes from SELEX experiments (where for example a #DNA site was held constant while a population of protein was evolved up to #pick out the best binders, and vice versa), throughout the entire file, #small letters mean that the position was held "constant" for the experiment, #while a capital letter means that that position was "randomized." In some #of the data, it is shown that Zif268 binds to a natural promoter. For these #natural "selection" experiments, cap letters are used for both DNA and #protein sequences to mark this data as "randomized." # #Abbreviations used here: f1 = finger 1, f2 = finger 2, f3 = finger 3. #a,c,g,t = the usual four DNA bases ; m = 5-methylcytosine; u = uracil. # #Users may copy and/or alter this file as they see fit, as long as #due reference to this file is made in any published or unpublished #work or presentations. # # Advice: the zif268 binding site is GC-rich. Unfortunately, a putative site, # natural or synthetic, is often flanked by Gs and Cs. (Even more, # it's not uncommon for zif268 and SP1 sites to overlap.) So it's often hard # to tell what actual DNA sequences should be written down here. That is, # to what extent do the "frame-shifted" binding sites that may only be two # or so mutations away from the high-affinity consensus site, contribute to # the overall affinity? # This problem clouds all the following experiments, and each paper has to # be handled on a case-by-case basis. Interference studies coupled with # well-chosen (mutant) binding sites really help in resolving this uncertainty. # #Here's the default amino acid sequence for the fingers. #This sequence applies to: # rat NGFI-A (Milbrandt, J. Science 238, 797-799 (1987)). # mouse Krox-24, mouse Krox-20 (Lemaire, P. et al. PNAS 85, 4691-4695 (1988)) # mouse zif268 (Christy, B.A. et al. PNAS 85, 7857-7861 (1988)). # mouse Egr-1 (Sukhatme, V.P. et al. Cell 53, 37-43 (1988)). # mouse Krox-20 (Chavrier, P. et al. EMBO J. 7, 29-35 (1988); Chavrier, P. et # al. Mol. Cell Biol. 9, 787-797 (1989)). # human EGR1 (Suggs, S.V. et al. Nucleic Acids Res. 18, 4283 (1990); # Wright, J.J. et al. Science 248, 588-591 (1990)). # human EGR2 (Joseph, L.J. et al. PNAS 85, 7164-7168 (1988)). # # This sequence is also reported via N.C.B.I.'s web page # (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). That is, go to the web page, click # "searching GenBank," then click "Entrez browser," then click to # search "proteins." Enter "EGR1" or "EGR2" and search all fields. # For EGR1, this sequence is reported for house mouse, zebrafish, human, # Norway rat. # For EGR2, this sequence is reported for house mouse, Norway rat, guppy ( # only fingers 1 and 2 reported), long-tailed hamster (only fingers 1 and 2 # reported), human. # #Note that all cap letters and no hyphen between the letters and the #egr type number tend to be used when denoting the human version of an #egr gene product. See the end of the file for other related proteins. # # -2-1 2 3 6 9 = relative helix positions. finger1 s r s d e l t r h i r finger2 s r s d h l t t h i r finger3 a r s d e r k r h t k # # # ------------------ # | w.t. fingers | # ------------------ # finger_1 : r d e r # finger_2 : r d h t # finger_3 : r d e r # ------------------ # # # --------------------------- # | w.t. binding site | # --------------------------- # 5' g c g t g g g c g t 3' # --------------------------- # ZF3 ZF2 ZF1 # --------------------------- # # # So, w.t. contacts are: # # gcgt rder # tggg rdht # gcgt rder # 5' g c g g g g g c g a f1 x x x x x x x x x x x f2 x x x x x x x x x x x f3 x x x x x x x x x x x 5' g c g g g g g a g a f1 x x x x x x x x x x x f2 x x x x x x x x x x x f3 x x x x x x x x x x x 5' g c g g g t g c g a f1 x x x x x x x x x x x f2 x x x x x x x x x x x f3 x x x x x x x x x x x 5' g c g t g g g c g a f1 x x x x x x x x x x x f2 x x x x x x x x x x x f3 x x x x x x x x x x x 5' g a g g g 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t a t a a a a g f1 - Q K T N - I T - - - f2 - Q Q T A - N Q - - - f3 - T L Q T - N R - - - 5' g c t a t a a a a g f1 - Q K T N - D T - - - f2 - Q H T G - N Q - - - f3 - T L H T - D R - - - 5' g c t a t a a a a g f1 - Q K N N - L A - - - f2 - Q L T G - N Q - - - f3 - T L H T - S R - - - 5' g c t a t a a a a g f1 - Q K N N - I N - - - f2 - Q R T G - D Q - - - f3 - T H A T - N R - - - 5' g c t a t a a a a g f1 - Q K T N - I T - - - f2 - Q Q T A - N Q - - - f3 - T L G T - D R - - - 5' g c t a t a a a a g f1 - Q K T N - D T - - - f2 - Q Q A S - N A - - - f3 - T L H T - T R - - - 5' g c t a t a a a a g f1 - Q K T N - I T - - - f2 - Q A A S - Q A - - - f3 - T S G D - G R - - - 5' t c a g g g g c g t f1 x x x x x x x x x x x f2 x x x x x x x x x x x f3 - T G N L - R R - - - 5' t c a g g g g c g t f1 x x x x x x x x x x x f2 x x x x x x x x x x x f3 - T P T N - K S - - - 5' t c a g g g g c g t f1 x x x x x x x x x x x f2 x x x x x x x x x x x f3 - T T T N - R S - - - 5' t c a g g g g c g t f1 x 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t t g g g f1 s r s d h l t t h i r f2 - M S H H - K E - - - f3 - Q R G T - T R - - - 5' a c a t g t t g g g f1 s r s d h l t t h i r f2 - M S H H - K E - - - f3 - Q Q G T - N R - - - 5' g g g a c a t g t t f1 - M S H H - K E - - - f2 - Q R G T - T R - - - f3 - R L H H - L L - - - 5' g g g a c a t g t t f1 - M S H H - K E - - - f2 - Q Q G T - N R - - - f3 - R L H H - T L - - - 5' g g g a c a t g t t f1 - M S H H - K E - - - f2 - Q R G T - T R - - - f3 - R L H H - L A - - - 5' g g g a c a t g t t f1 - M S H H - K E - - - f2 - Q R G T - T R - - - f3 - R H H H - L V - - - 5' g g g a c a t g t t f1 - M S H H - K E - - - f2 - Q Q G T - N R - - - f3 - R L H H - V L - - - 5' g g g a c a t g t t f1 - M S H H - K E - - - f2 - Q R G T - T R - - - f3 - R L H H - L V - - - 5' g c g g g g g c g t f1 x x x x x x x x x x x f2 s R S D H l I R - - - f3 x x x x x x x x x x x 5' g c g g g g g c g t f1 x x x x x x x x x x x f2 s R S D H l T R - - - f3 x x x x x x x x x x x 5' g c g g g g g c g t f1 x x x x 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